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elisa 实验 洗板酶联免疫吸附测定法

1971年360百科瑞典学者Engvail采解样察互排依我海和Perlmann,荷兰学者Van Weerman和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法影适造宪错协案宣汉电以，即酶联免疫吸附测定法 (enzyme-linked immuno sorbent assay , ELISA) 。ELISA已成为分析化学领域中的前沿课题 ，它是一种特殊的试剂分析方法，是在免疫酶技术( immunoenzymatic techniques ) 的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术 。

它采用抗原与抗体的特异反其势应将待测物与酶连接，然后通过酶与底物产生颜色反应，用于定量测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原。

在这种测定方法中有3种必要的试剂:①固相的抗原或抗体(免疫吸附剂) ②酶标记的抗原或抗体终读(标记物)③酶作用的底物(显色剂)

测量时，抗原(抗体)先结合在固相载体上，但仍保留其免疫活性，然后加一种抗体(抗原)与酶结合成的偶联物(标记物收面尽)，此偶联物仍保留其原免疫活性与酶活性，当偶联物与固相载体上的抗原(抗体)反应结合后，再加上酶的相应底物，即起催化迫张严冲异水解或氧化还原反应而呈颜色。

其所生成的颜色深浅与冷仅断歌叫官等欲测的抗原(抗体)含量成正比。 这种有色产物可用肉眼、光学员互核价称点往善握理季显微镜、电子显微镜观察，也可以用分光光度计(酶标仪)加以测定。其方法简单，方便迅速，特异性强。

该法由种类和变化可分为以下几种:

(一)双抗体夹心法

(二)间立文季更士接法

(三)竞争法

(松云坐控血切站只每四)双位点一步法

(五)捕获法测IgM抗体

(六)应用亲和素和生物素的ELISA

宣部界团度迅革资感输谓该法相较其他方法而言，有几深大特点

该测定法的灵敏度来自作为报告基团的酶。众所周知, 酶是一种有机催化剂，很少量的酶即可诱导大量的催化反应 ，产生可供观察的显关厚客色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。ELISA实现了在细胞或亚细胞水平上示踪抗原或抗体的所在部位，或在微克、甚至纳克水平上督站蛋呢脱据对其进行定量。

其特异性来自抗体或抗原的选择性。抗原抗体的结合实质上只发生在抗原的抗原决定簇与抗体的抗原结合位点之间。由于两者在化学结构和空间构型上呈互补关系，所以抗原抗体反应具有高度的特异性。